退火温度的定义(退火温度的高低由什么因素决定)

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1、退火温度是影响PCR反应特异性的重要因素。

2、引物和模板复性所需的退火温度取决于引物的长度、碱基组成和浓度。

3、引物长度越短,引物中G C含量越低,退火温度越低。

4、虽然降低退火温度可能增加扩增产量,但引物和模板之间的错配也会增加,导致非特异性扩增增加。

5、相反,提高退火温度虽然可以提高反应的特异性,但会导致扩增效率降低,甚至不会出现扩增产物。

6、引物的退火温度可以通过公式Tm=4(G C) 2(A T)来估算。通常,从计算的Tm值中减去5摄氏度是非常适合反应设计的退火温度。

关于退火温度的定义,退火温度的高低由什么因素决定的介绍到此结束,希望对大家有所帮助。

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