德国研究员开发乙肝新治疗性疫苗 乙肝在研新药DNA-HBVac进度公布

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一种治疗性乙肝疫苗DNA-HBVac，在2020年欧洲肝脏学术研究年会（EASL 2020）上由德国研究人员公布最新开发进展。这种治疗性乙肝疫苗名称为DNA-HBVac，本届欧肝会上，德国研究人员介绍了这种研究药物，并指出该药有望成为慢性乙肝的候选治疗性乙肝疫苗。

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治疗性乙肝疫苗是目前乙肝在研新药靶点之一。这种靶点药物主要通过治疗性疫苗，诱导乙肝病毒特异性免疫应答从而有望实现既定目标功能性治愈（临床治愈）。肝病领域药物学家以往认为，这种诱导病毒特异性免疫应答是治疗慢性乙肝感染的一种有前途的新疗法。德国研究人员认为，我们开发了一种临床候选治疗性乙肝疫苗（TherVacB）。

它是以DNA为基础的治疗性乙肝疫苗，其基础是用重组乙肝表面抗原（HBsAg）和乙肝核心抗原（HBcAg）进行两种蛋白免疫，并用表达乙肝病毒抗原的改良痘苗病毒（MVA）增强。此前，药物学界观察到的重组蛋白纯化非常复杂和昂贵缺点，可以使用这种新型治疗性乙肝疫苗DNA-HBVac来克服，以实现临床应用价值。

德国研究人员解释，这种疫苗可以直接在体内产生感兴趣的抗原。因此，目标是生产涵盖最常见的乙肝病毒基因型和血清型的DNA疫苗，以扩大和改善TherVacB诱导的B细胞和T细胞免疫应答。具体研究方法如下：制备治疗性乙肝疫苗DNA-HBVac（DNA疫苗），编码A、B/C基因型HBV大小包膜蛋白、B/C、D基因型核心蛋白和HBV逆转录酶（RT）结构域。

使用Western印迹和ELISA检测，表达抗原的稳定性和完整性。在C57BL/6小鼠和AAV-HBV小鼠模型中，检测DNA-HBVac的免疫原性。使用ELISA和流式细胞术，检测HBV特异性B细胞和T细胞反应。研究结果表明，在体外分析显示，所有的DNA-HBVac编码的HBV蛋白均得到正确表达。使用DNA-HBVac-prime和MVA-HBVac-boost免疫C57BL/6小鼠，证明是安全和耐受性良好的。

在与以前的免疫策略相比，该方案产生了非常强的HBV特异性CD8和CD4 T细胞反应，但正如预期的那样，乙肝表面抗体（抗-HBs）反应较低。采用持续性HBV感染模型，AAV-HBV转基因小鼠，可以证明DNA-HBVac引发的强核、包膜和小鼠肝脏中的HBV逆转录酶（RT）特异性CD8细胞反应。此外，研究人员观察到，在DNA-HBVac疫苗接种期间，血清ALT显著升高，提示肝脏细胞毒性T细胞活性增加。

而这些强烈的HBV特异性CD8 T细胞反应，导致一些小鼠的血清乙肝表面抗原和乙肝e抗原显著降低，甚至实现清除HBV。基于上述研究数据以及安全性耐受性结果，德国研究人员指出，这种乙肝在研新药DNA-HBVac，是不需要耗费大量人力和昂贵的重组蛋白纯化的，它是一种很有前途的可应用于TherVacB方案的重组蛋白启动剂。

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